張寧，蔣劍春*，楊靜，衛民，趙劍，童婭娟
（中國林業科學研究院 林產化學工業研究所； 生物質化學利用國家工程實驗室； 國家林業局 林產化學工程重點開放性實驗室； 江蘇省 生物質能源與材料重點實驗室，江蘇 南京 210042）
摘 要：應用低能氮離子（N+）注入技術對纖維素酶產生菌里氏木霉（Trichoderma reesei）進行誘變選育，在能量為 10 keV，注量為150×1014和200×1014 N+/cm2的條件下分別篩選得到3株纖維素酶高產菌株，連續5代遺傳穩定性實驗結果表明，所得到的高產菌株遺傳穩定性較好，羧甲基纖維素酶活力均提高到3.300 IU/mL 以上，較出發菌株 （2.698 IU/mL） 提高了20.0%以上。采用Plackett-Burman實驗設計法和旋轉中心組合設計法系統地研究高產菌株 150-1-1 發酵營養因子組成，得到了纖維素酶產量隨葡萄糖、麩皮和微晶纖維素等營養因子的變化規律及相應的響應面分析圖。實驗結果表明，葡萄糖、麩皮和微晶纖維素濃度與纖維素酶活存在顯著的相關性，當葡萄糖濃度為4.9 g/L，麩皮濃度為23.0 g/L，微晶纖維素濃度為7.7 g/L時，150-1-1纖維素酶濾紙酶活力達到2.439 IU/mL，較優化前 （2.000 IU/mL） 提高了22.0%。
關鍵詞：N+離子注入；里氏木霉；纖維素酶
中圖分類號：TQ352;Q815 文獻標識碼：A 文章編號：1673-5854（2014）04-0028-07
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